Reconheça a coloração
No HE de parafina, a gordura aparece como buraco branco. No Oil Red O feito em congelação, o mesmo lugar fica cheio de gotas vermelhas — a prova de que ali havia lipídio.
Figura 1. Fígado com esteatose, corte congelado, Oil Red O com contracoloração por hematoxilina, 200x. Gotas lipídicas vermelho-alaranjadas no citoplasma dos hepatócitos; núcleos azuis.
- 1Gotas vermelhasLipídios neutros (triglicerídeos, ésteres de colesterol) corados pelo Oil Red O.
- 2Tamanho das gotasUma gota grande que empurra o núcleo = macrovesicular; muitas gotas finas com núcleo central = microvesicular.
- 3Núcleos azuisContracoloração com hematoxilina, sem diferenciação ácida-alcoólica.
- 4Montagem aquosaA lâmina não pode passar por álcool nem xilol — senão a gordura sai.
Figura 2. Por que a gordura some na parafina e permanece no corte congelado.
Parafina
Álcoois e xilol dissolvem os lipídios: no HE ficam vacúolos vazios.
Congelação
Tecido fresco ou fixado em formol, cortado no criostato: lipídios preservados.
Lisocromo
O corante é mais solúvel na gordura do que no solvente: migra para dentro da gota.