Giemsa e Leishman

Reconheça a coloração

Num esfregaço bem corado, cada célula tem uma "assinatura" de cor. O segredo é o efeito Romanowsky: a cromatina fica púrpura — uma cor que nenhum dos corantes dá sozinho.

Lâmina histológica

Figura 1. Esfregaço de sangue periférico, Leishman, 1000x (imersão). Hemácias róseas com halo central claro, um neutrófilo segmentado, um linfócito pequeno e plaquetas violáceas.

Roteiro de observação

1
HemáciasRosa-alaranjadas, com palidez central de cerca de um terço do diâmetro.
2
NúcleosPúrpura; segmentado (neutrófilo), bilobado (eosinófilo), redondo e denso (linfócito), reniforme (monócito).
3
GrânulosLilases finos (neutrófilo), laranja-avermelhados grossos (eosinófilo), azul-escuros que cobrem o núcleo (basófilo).
4
PlaquetasPequenos fragmentos violáceos e granulosos, entre as hemácias.

Em 30 segundos

O essencial de visão geral

São colorações de Romanowsky: mistura de azul de metileno oxidado (azures) e eosina, em metanol.
Leishman (e Wright) fixa e cora ao mesmo tempo; o Giemsa é diluído em tampão após fixar com metanol.
O pH do tampão (cerca de 6,8–7,2) define o equilíbrio: ácido demais avermelha, alcalino demais azula.
Giemsa é a referência para malária (gota espessa e esfregaço delgado) e é usado também em cortes (H. pylori, mastócitos).

O que são as colorações de Romanowsky

Diferentemente do HE, feito em cortes, estas colorações são feitas sobre células inteiras espalhadas em lâmina (esfregaço), secas ao ar e fixadas em metanol. Giemsa, Leishman, Wright e May-Grünwald-Giemsa são variações da mesma ideia.

A leitura é feita na região de monocamada, perto da "franja" do esfregaço, com objetiva de imersão (1000x). Na cauda, as células se deformam; na cabeça, se sobrepõem.

A assinatura de cada leucócito

É a tabela que se usa para a contagem diferencial — memorize núcleo e grânulo de cada um.

Célula	Núcleo	Citoplasma / grânulos
Neutrófilo	3–5 lobos ligados por filamentos	Rosa-claro, grânulos finos lilases
Eosinófilo	Geralmente bilobado	Grânulos grossos laranja-avermelhados
Basófilo	Bilobado, encoberto	Grânulos grossos azul-escuros a púrpura
Linfócito	Redondo, cromatina densa	Orla escassa azul-celeste
Monócito	Reniforme ou dobrado, cromatina rendada	Azul-acinzentado, às vezes vacuolado

Romanowsky em quatro situações

Roteiro: confira primeiro se a coloração está boa (hemácias rosadas, núcleos púrpura); depois identifique as células.

Os cinco leucócitos

Montagem de esfregaço periférico, Leishman ou Wright, 1000x. Neutrófilo, eosinófilo, basófilo, linfócito e monócito lado a lado, cada um com sua cor de núcleo e de grânulo. É a prancha de referência para a contagem diferencial.

Leishman1000xLeucócitos

Malária: esfregaço delgado

Sangue, Giemsa, 1000x. Hemácias com formas em anel do plasmódio: citoplasma azul em anel e um ou dois pontos de cromatina vermelho-púrpura. O tampão em pH 7,2 ajuda a mostrar os detalhes do parasita e das hemácias parasitadas.

GiemsaMaláriaParasita

Medula óssea

Aspirado de medula, May-Grünwald-Giemsa, 1000x. Precursores em vários estágios: eritroblastos de citoplasma azul que fica rosado ao amadurecer, mielócitos com grânulos e um megacariócito grande. A coloração é a mesma do sangue, com mais células por campo.

MGGMedulaHematopoese

Coloração ruim: pH errado

Dois campos do mesmo sangue. À esquerda, coloração ácida: hemácias vermelho-vivas, núcleos pálidos. À direita, alcalina: tudo azulado, hemácias acinzentadas e grânulos do neutrófilo escuros demais. Corrigir o pH antes de interpretar.

Controle de qualidadepHArtefato

Lâmina com células soltas (não um corte de tecido), hemácias rosadas sem núcleo e leucócitos de núcleo púrpura é um esfregaço corado por Romanowsky. A leitura é feita em imersão, na monocamada.

Aumento a aumento

100x — qualidade
Esfregaço com cabeça, corpo e franja; cor homogênea; busque a área onde as hemácias apenas se tocam.
100x — panorama
Estime a quantidade de leucócitos e procure células grandes ou aglomerados na borda e na franja.
400x — triagem
Distribuição de hemácias (rouleaux, aglutinação), plaquetas agregadas, células atípicas.
1000x (imersão) — identificação
Núcleo, cromatina, cor do citoplasma e dos grânulos de cada leucócito; morfologia das hemácias; inclusões e parasitas.

Pegadinhas

Precipitado de corante sobre hemácias imita parasitas ou plaquetas. Ler na cauda deforma e concentra leucócitos grandes. Neutrófilo com grânulos muito escuros pode ser só pH alcalino, não granulação tóxica.

Descrição-modelo para a prova prática

Modelo de descrição

Esfregaço de sangue periférico corado por [Leishman / Giemsa / Wright], observado em imersão (1000x). Hemácias anucleadas, róseas, bicôncavas, com palidez central. Plaquetas pequenas, violáceas e granulosas. Leucócito apontado: [célula], com núcleo [segmentado em 3–5 lobos / bilobado / redondo e denso / reniforme] e citoplasma [com grânulos finos lilases / grânulos alaranjados / grânulos azul-escuros / azul-celeste escasso / azul-acinzentado].

Na prova, descreva núcleo e grânulos antes de nomear a célula.

Romanowsky ou outra coloração?

O tipo de preparado (esfregaço × corte) e as cores separam as técnicas. Dentro do esfregaço, a dúvida é qual leucócito se está vendo.

Técnica / célulaAchado-chaveComo diferenciar

Hematoxilina-eosina

Achado-chaveCorte de tecido, núcleo azul-roxo

Como diferenciarCélulas cortadas dentro do tecido; grânulos de leucócitos pouco distintos.

Azul de toluidina

Achado-chaveGrânulos metacromáticos violeta

Como diferenciarUma só cor de corante; destaca mastócitos e basófilos, não diferencia os outros leucócitos.

Neutrófilos

Achado-chaveNúcleo segmentado, grânulos lilases

Como diferenciarGrânulos finos, quase invisíveis; núcleo bem visível.

Basófilos

Achado-chaveGrânulos azul-escuros grosseiros

Como diferenciarGrânulos cobrem o núcleo; os do eosinófilo são alaranjados e não o escondem.

Mesmo com contadores automáticos, o esfregaço corado continua sendo o exame que confirma alterações do hemograma e diagnostica parasitas.

Para que o laboratório usa

Revisão do hemograma

Confirma alertas do contador: blastos, desvio à esquerda, células atípicas, agregados plaquetários.

Parasitas

Malária (gota espessa para achar, esfregaço delgado para a espécie), filárias, tripanossomas.

Morfologia eritrocitária

Esquizócitos, esferócitos, drepanócitos e inclusões que orientam anemias.

Em cortes

Giemsa destaca Helicobacter pylori no estômago e grânulos de mastócitos; Leishmania em amastigotas.

Romanowsky = núcleo púrpura + grânulos com cor própria. Identifique o leucócito pelo núcleo e pelo grânulo, nessa ordem.

Giemsa × Leishman

Leishman / Wright

Corante em metanol: fixa e cora em uma etapa
Rápido, rotina do hemograma
Bom detalhe de grânulos

Giemsa

Fixação prévia com metanol; corante diluído em tampão
Padrão para malária (gota espessa não é fixada)
Ótima definição de cromatina e parasitas

Referências bibliográficas

1
Livro-texto2019
Suvarna SK, Layton C, Bancroft JD. Bancroft’s Theory and Practice of Histological Techniques. 8. ed. Elsevier; 2019.
2
Livro-texto2015
Bain BJ. Blood Cells: A Practical Guide. 5. ed. Wiley-Blackwell; 2015.
3
Diretriz2010
World Health Organization. Basic Malaria Microscopy. Part I: Learner’s guide. 2. ed. Geneva: WHO; 2010.
4
Livro-texto2023
Junqueira LC, Carneiro J. Histologia Básica: texto e atlas. 14. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 2023.
5
Livro-texto2021
Ross MH, Pawlina W. Histologia: texto e atlas — correlações com biologia celular e molecular. 8. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 2021.

Fontes das imagens

As imagens deste atlas têm finalidade educacional e foram produzidas a partir de lâminas histológicas reais e de representações didáticas.

Parte delas pode ter sido editada ou aprimorada digitalmente para destacar as estruturas e os achados descritos no texto.

Aviso importante

Material educacional. Não substitui o laudo anatomopatológico, a avaliação clínica, os protocolos institucionais nem a consulta às bulas.