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Atlas de Histologia • Técnicas e colorações

Hematoxilina-eosina (HE)

Coloração HE • hematoxylin and eosin, H&E

A coloração de rotina da histologia e da patologia. A hematoxilina, com mordente metálico, cora de roxo-azulado as estruturas basófilas (núcleo, RER); a eosina cora de rosa as acidófilas (citoplasma, colágeno, músculo). O que ela não mostra é tão importante quanto o que mostra.

Tipo
Coloração de rotina (dupla)
Princípio
Basofilia × acidofilia
Pista na lâmina
Núcleo roxo, citoplasma rosa
Uso
Morfologia geral de tecidos
9–11 min de leitura Atualizado em outubro de 2026

Reconheça a coloração

Uma lâmina em HE tem só duas cores básicas e suas misturas: roxo-azulado e rosa-avermelhado. O esquema mostra por que cada estrutura pega uma ou outra.

Lâmina histológica

Figura 1. Corte de intestino delgado em HE, 100x. Núcleos roxo-azulados no epitélio e nas glândulas; citoplasma, lâmina própria e músculo em diferentes tons de rosa; muco das caliciformes quase incolor.

Roteiro de observação
  1. 1
    RoxoNúcleos, nucléolos e citoplasma rico em RER ou ribossomos (plasmócitos, ácinos serosos).
  2. 2
    RosaCitoplasma comum, colágeno, músculo, queratina; hemácias em vermelho-alaranjado vivo.
  3. 3
    BrancoGordura e glicogênio (extraídos no processamento) e muco: aparecem vazios ou pálidos.
  4. 4
    Tons de rosaMúsculo mais forte que colágeno; colágeno mais forte que citoplasma de fibroblasto.

Em 30 segundos

O essencial de visão geral

  1. Basófilo = tem afinidade pela hematoxilina (roxo): núcleo, RER, ribossomos, matriz da cartilagem.
  2. Acidófilo (eosinófilo) = tem afinidade pela eosina (rosa): citoplasma, mitocôndrias, colágeno, músculo.
  3. A hematoxilina só cora bem com um mordente (alúmen de alumínio) e depois do azulamento em meio alcalino.
  4. Espaços vazios em HE costumam ser lipídio ou glicogênio dissolvidos — confirme com Sudan/Oil Red O ou PAS.

O que é a coloração HE

A HE é a primeira coloração feita em praticamente toda biópsia e em quase todas as lâminas de aula. É barata, rápida, reprodutível e mostra a arquitetura do tecido e os detalhes do núcleo.

Ela não identifica substâncias específicas: aponta onde há ácidos nucleicos e onde há proteínas. Quando a dúvida é química (glicogênio, muco, fibras, lipídio, microrganismo), entram as colorações especiais e a imuno-histoquímica.

Etapas da coloração

O corte em parafina não aceita corantes aquosos: precisa ser desparafinado e hidratado antes, e desidratado depois para a montagem.

  1. Desparafinar e hidratar

    Xilol remove a parafina; álcoois em concentração decrescente levam o corte à água.

  2. Hematoxilina

    Harris (regressiva, aplicada em excesso) ou Mayer (progressiva, até o ponto certo).

  3. Diferenciar e azular

    Álcool ácido remove o excesso (método regressivo); água corrente ou solução alcalina converte o roxo-avermelhado em azul-arroxeado.

  4. Eosina

    Contracoloração do citoplasma e da matriz em tons de rosa.

  5. Desidratar, clarificar e montar

    Álcoois crescentes, xilol e lamínula com meio de montagem resinoso.

A HE em quatro tecidos

Roteiro: identifique o que está roxo, o que está rosa e o que ficou branco — e pergunte por quê.

Basofilia citoplasmática

Pâncreas exócrino, HE, 400x. A base dos ácinos é roxa (RER abundante) e o ápice é rosa (grânulos de zimogênio). Mostra que o citoplasma também pode ser basófilo quando rico em RNA.

HEBasofiliaRER

Acidofilia em tons

Músculo esquelético e conjuntivo, HE, 200x. Fibras musculares em rosa intenso com núcleos periféricos; colágeno em rosa mais pálido; hemácias em vermelho-alaranjado brilhante.

HEEosinofilia

Espaços "vazios"

Tecido adiposo e fígado, HE, 200x. Adipócitos aparecem como anéis finos de citoplasma em volta de um grande vazio (lipídio extraído); hepatócitos ricos em glicogênio têm citoplasma rendilhado e pálido.

HELipídioGlicogênio

Mucina pálida

Intestino grosso, HE, 400x. Células caliciformes com teca clara, quase incolor ou azul-acinzentada: as mucinas coram mal em HE. Compare com a mesma área em PAS, onde ficam magenta.

HEMucinaCaliciforme

Reconhecer a HE é fácil; ler uma lâmina em HE é o trabalho. Use a coloração para separar compartimentos e sempre pergunte o que pode ter se dissolvido.

Aumento a aumento

  1. Olho nu — o tom geral

    Lâmina rosa-arroxeada. Áreas mais roxas = muitas células (linfoide, epitélio, tumor); mais rosas = colágeno, músculo, queratina.

  2. 40x — arquitetura

    Use o contraste roxo/rosa para separar epitélio, estroma, folículos linfoides, vasos e músculo.

  3. 100x — padrão celular

    Densidade de núcleos, formação de glândulas, camadas, espaços claros.

  4. 400x — núcleo e citoplasma

    Cromatina (eucromática clara ou heterocromática densa), nucléolo, basofilia ou acidofilia do citoplasma, grânulos.

  5. Avalie a qualidade

    Núcleos avermelhados = azulamento insuficiente; tudo rosa demais = eosina em excesso; pigmento marrom granular fora das células = pigmento de formol.

Pegadinhas

"Basófilo" não é sinônimo de "núcleo": citoplasma rico em RER também é roxo. Vacúolo vazio não prova lipídio — pode ser glicogênio, artefato de retração ou muco. Fibras elásticas e reticulares quase não aparecem em HE.

Descrição-modelo para a prova prática

Modelo de descrição

Corte histológico de material fixado em formol e incluído em parafina, corado por hematoxilina-eosina. Núcleos corados em roxo-azulado pela hematoxilina; citoplasma, fibras colágenas e músculo em diferentes tons de rosa pela eosina; hemácias em vermelho-alaranjado. Espaços claros correspondentes a lipídios extraídos no processamento. Coloração de boa qualidade, com bom contraste nuclear e citoplasmático.

Em prova, cite sempre a coloração antes de descrever o tecido.

HE ou outra coloração?

Em prova prática, é comum ter de dizer a coloração antes do tecido. Fuja da HE quando aparecem azul, verde, preto, magenta ou marrom dominando o campo.

ColoraçãoAchado-chaveComo diferenciar da HE
Tricrômico de Masson
Achado-chaveColágeno azul ou verde
Como diferenciar da HEMúsculo e citoplasma vermelhos, núcleos escuros; em HE o colágeno seria rosa.
PAS
Achado-chaveMagenta em muco, glicogênio e membrana basal
Como diferenciar da HEEstruturas que ficam pálidas na HE aparecem em magenta forte.
Impregnação argêntica
Achado-chaveFibras pretas sobre fundo amarelado
Como diferenciar da HERede reticular ou neurofibrilas em preto; sem o contraste roxo/rosa.
Giemsa e Leishman
Achado-chaveEsfregaço; núcleos azul-violeta
Como diferenciar da HEUsada em sangue e medula; grânulos de leucócitos com cores próprias.
Imuno-histoquímica
Achado-chaveMarrom (DAB) sobre fundo azul claro
Como diferenciar da HESó as células com o antígeno ficam marrons; contracoloração por hematoxilina.

A HE resolve a maior parte dos diagnósticos histopatológicos. Saber seus limites evita conclusões erradas e indica qual exame complementar pedir.

Para que serve no laboratório

Diagnóstico de tumores, inflamação, necrose e alterações de arquitetura começa na HE. Atipia nuclear — núcleos grandes, hipercromáticos, com nucléolo evidente — é lida justamente pela hematoxilina.

Congelação

No intraoperatório, a HE em corte por congelação dá resposta em minutos (margem, natureza da lesão).

Atipia e mitoses

Hipercromasia e figuras de mitose dependem de boa hematoxilina e bom azulamento.

Necrose

Eosinofilia aumentada do citoplasma com picnose, cariorrexe ou cariólise do núcleo.

Próximo passo

Dúvida química ou de linhagem → coloração especial ou imuno-histoquímica.

HE mostra forma e arquitetura; não identifica substâncias. O vazio da HE é uma pergunta, não uma resposta.

Artefatos comuns

  • Pigmento de formol: grânulos marrom-escuros em áreas ricas em sangue, fora das células (formol ácido).
  • Retração: espaços artificiais em volta de células e glândulas, por desidratação.
  • Dobras e riscos da navalha: faixas mais escuras ou linhas paralelas atravessando o corte.
  • Azulamento insuficiente: núcleos avermelhados, com pouco contraste.

Referências bibliográficas

  1. 1
    Livro-texto2019
    Suvarna SK, Layton C, Bancroft JD. Bancroft’s Theory and Practice of Histological Techniques. 8. ed. Elsevier; 2019.
  2. 2
    Livro-texto2023
    Junqueira LC, Carneiro J. Histologia Básica: texto e atlas. 14. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 2023.
  3. 3
    Livro-texto2021
    Ross MH, Pawlina W. Histologia: texto e atlas — correlações com biologia celular e molecular. 8. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan; 2021.
  4. 4
    Livro-texto2022
    Gartner LP. Tratado de Histologia. 5. ed. Rio de Janeiro: Elsevier; 2022.
  5. 5
    Livro-texto2021
    Kumar V, Abbas AK, Aster JC. Robbins & Cotran Patologia: bases patológicas das doenças. 10. ed. Rio de Janeiro: Elsevier; 2021.

Fontes das imagens

As imagens deste atlas têm finalidade educacional e foram produzidas a partir de lâminas histológicas reais e de representações didáticas.

Parte delas pode ter sido editada ou aprimorada digitalmente para destacar as estruturas e os achados descritos no texto.

Aviso importante

Material educacional. Não substitui o laudo anatomopatológico, a avaliação clínica, os protocolos institucionais nem a consulta às bulas.

Atlas Astrenmed de Histologia • Conteúdo para educação médica. O diagnóstico e a conduta dependem da avaliação clínica individual.
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